血友病A（HA）是一种X连锁遗传性出血性疾病，由凝血因子VIII（FVIII）缺乏或功能障碍引起，导致终身性出血倾向，通常累及关节和肌肉。反复关节出血常引发血友病性关节病变，表现为慢性疼痛、关节畸形和进行性残疾，严重损害患者生活质量。中国血友病A患者负担沉重，全国约有8万至10万名血友病A患者。目前，标准治疗方案是终身预防性输注FVIII制剂，虽然能控制出血，但需要频繁静脉输注，不仅给患者带来沉重的治疗负担，还约有20-30%的患者会产生FVIII抑制物，导致治疗失效。近年来，基因疗法为血友病A根治带来了希望，但如何解决免疫原性问题，维持治疗效果仍是领域内亟待突破的难题。

2026年3月11日，中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）张磊/杨仁池团队在国际顶级期刊Signal Transduction and Targeted Therapy在线发表了题为“Phase 1 pilot study for hemophilia-A: AAV8 vector with prophylactic tacrolimus-glucocorticoid achieves therapeutic FVIII activity”的开创性研究论文，该前瞻性一期试点研究针对基于腺相关病毒8型（AAV8）的血友病A基因治疗药物GS001展开探索，首次证实预防性他克莫司-糖皮质激素联合免疫抑制方案下，AAV8载体介导的B域缺失型FVIII基因治疗能在患者体内实现稳定的治疗级FVIII活性，为血友病A基因治疗的临床应用提供了关键的中国证据。

试验过程

2021年3月至2023年5月，对40名严重HA参与者进行了筛查。最后，12名参与者被纳入两个剂量队列（6名在2×1012vg/kg队列中，6名在4×1012v/kg队列中；图1）。参与者的人口统计和基线特征见表1和补充表1。参与者的平均年龄为27.7岁 ± 8.0 年份（表1）。在入组前，9名参与者接受了低剂量FVIII预防性治疗。

在低剂量队列中输注GS001后，外周FVIII:C中位数在一周内迅速上升至50.4 IU/dL（范围为5.0-127.7 IU/dL），在正常范围内（50.0-150.0 IU/dL），并在5.5周（范围为1.0-7.0周）达到峰值中位数80.4 IU/dL（范围为32.9-127.7 IU/dL）。（图2a-b，补充图3）。第16.0周后，六名参与者中有五名的FVIII:C水平逐渐稳定在10.0 IU/dL以上，在轻度血友病范围内（定义为：5.0-40.0 IU/dL）。在这些参与者中，有两名达到轻度血友病水平（8.1 IU/dL和10.5 IU/dL），一名达到正常水平（52.4 IU/dL），两名达到中度血友病水平（1.0 IU/dL和3.1 IU/dL，定义为：1.0-5.0 IU/dL。

在低剂量队列中，在载体输注前7天，参与者1-3接受预防性泼尼松治疗，参与者4-6接受预防性泼尼松联合他克莫司治疗。我们进行了一项探索性分析，比较了参与者1-3和参与者4-6的FVIII:C水平。与参与者1-3相比，参与者4-6的FVIII:C增加更快，并在载体输注后7天内达到更高水平。

GS001输注后第3.0周至截止日期的ABR中值（范围）/均值（±SD）从11.0（7.0-30.0）/14.2± 9.3 事件至0.8（0-10.0）/2.6± 3.9 低剂量队列中的事件（图3a）和12.5（8.0-20.0）/13.0± 4.6 到0（0-0.5）/0.2± 0.2 高剂量队列中的事件（图3b）。高剂量队列中的参与者在输注GS001后均未出现任何需要外源性FVIII治疗的出血事件。两名参与者因关节置换术接受了低剂量FVIII预防性治疗。在高剂量队列中，一名参与者在载体输注后53.0周将FVIII:C维持在109.0 IU/dL。然后在整个手术过程中接受了右膝关节置换术、右髋关节置换术和左膝关节置换手术，没有进行FVIII置换治疗。

在低剂量队列中，最常见的GS001治疗相关TEAE是ALT和乳酸脱氢酶（LDH）升高，3/6（50%）的参与者报告了这两种情况（定义为观察值 > 1×正常上限）（补充表3和表4）。所有这些与GS001相关的TEAE严重程度均为1级或2级。

所有12名参与者（100%）接受了预防性糖皮质激素治疗，9名（75%）接受了糖皮质激素加他克莫司的预防性治疗。4至12名参与者接受他克莫司治疗，中位持续时间为154天（137-341天）。所有11名参与者（91.7%）报告了由糖皮质激素引起的不良事件。最常见的事件是白细胞计数增加、痤疮、低钾血症、失眠和体重增加。12名参与者中有6名报告了他克莫司引起的不良事件。除两例肛门感染外，所有不良事件的严重程度均为1级，无需干预即可解决。没有参与者出现糖皮质激素或他克莫司引起的严重不良反应。

为了进一步了解他克莫司在HA基因治疗中的免疫抑制作用，分析了参与者8-11在治疗一周后的外周血PBMC。用羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记PBMC，用抗CD3/28珠激活，并用不同剂量的他克莫司处理。72小时后，使用流式细胞术评估T细胞存活率、亚群比例和增殖（图4a）。培养后，用CD4/CD8抗体对细胞进行染色，并测量CFSE以评估T细胞亚群增殖（图4b）。流式细胞术结果（图4d）显示，他克莫司显著降低了CD8+T细胞的比例，对CD4+T细胞的影响很小。CFSE水平分析显示，他克莫司显著抑制了活化CD8+T细胞的增殖，对CD4+T细胞增殖没有显著影响（图4e）。

研究人员在四个时间点对八名参与者的PBMC进行了scRNA测序，在第3天和第28天，T/NK细胞的百分比低于第0天，而PBMCs中单核细胞和B细胞的百分比高于第0天（图5b）。CD8差异基因表达分析⁺T细胞（第3天和第28天与第0天相比）鉴定出顶级候选基因（图5d；补充表7），包括干扰素相关基因，如DDIT4、IRF7、CD81、ISG15、PCBP1、RBM38、JUND和STAT2。定量聚合酶链式反应（qPCR）验证证实了它们的下调，当来自四名参与者（参与者5-8）的样本被分为FVIII上升期（第3-7周）和下降期（第8-12周）时，这与FVIII:C的下降相关（图5e；补充表8-9）。scRNA分析表明，泼尼松加他克莫司预处理有效地抑制了两个参与者队列中的CD8+T细胞免疫反应。

研究表明，预防性使用泼尼松和他克莫司有效地减少了特异性T细胞反应的数量，并有助于减少AAV输注引起的特异性免疫反应。在低剂量组中，接受联合免疫抑制方案的参与者比仅接受泼尼松的参与者表现出更快的FVIII水平升高和更高的峰值FVIII水平，进一步证明了他克莫司在调节免疫反应方面的独特作用。

总之，GS001在严重HA患者中显示出良好的疗效和耐受性，迅速达到接近正常的FVIII:C水平，并在两年内将其维持在临床相关水平。通过整合新型高效盒和糖皮质激素和他克莫司的预防性联合给药，GS001取得了令人鼓舞的结果。这一突破减少了参与者的出血事件和FVIII的使用。

研究意义

张磊教授在研究中指出：“本研究是我国首个自主完成的血友病AAV基因治疗一期临床研究，首次证实了在预防性免疫抑制方案下，AAV8介导的FVIII基因治疗能在重型血友病A患者中安全实现持续的治疗级FVIII活性，显著改善临床预后，这是我国血友病基因治疗领域的里程碑进展。”

杨仁池教授也表示，血友病A是单基因遗传病，根治的希望就是基因治疗，本研究解决了当前基因治疗中免疫抑制策略的关键问题，为后续大规模多中心临床研究奠定了基础，也为我国血友病患者带来了根治的希望。相较于国外已上市的基因疗法，本研究采用的预防性免疫抑制方案成本更低，安全性更好，更符合中国患者的临床需求。

结    语

当前，血友病在我国的治疗现状仍不容乐观，由于替代治疗药物价格昂贵，很多患者无法获得规范治疗，导致关节畸形致残率高。基因疗法一次给药、长期获益的特点，有望从根本上改变血友病的治疗模式。本研究的突破性进展，标志着我国血友病基因治疗已经进入国际第一梯队，随着后续临床研究的推进，预计未来5-10年，国产血友病基因治疗药物有望获批上市，让更多中国血友病患者能够用得上、用得起根治性治疗。

参考文献

1：Phase 1 pilot study for hemophilia-A: AAV8 vector with prophylactic tacrolimus-glucocorticoid achieves therapeutic FVIII activity

免责声明：本文旨在科普相关知识，不作为医疗指导意见

编辑｜Zhang.ZG

审核｜Geng.ZG